Bioline™ Dengue Duo

Bioline™ Dengue Duo là xét nghiệm xét nghiệm được sử dụng để phát hiện đồng thời kháng nguyên Dengue NS1 và kháng thể Dengue IgG/IgM. Vậy Xét nghiệm Bioline™ Dengue Duo sử dụng như thế nào? Cần lưu ý gì khi sử dụng. Hãy cùng Trung Tâm Thuốc Central Pharmacy (trungtamthuoc.com) tìm hiểu về Xét nghiệm Bioline™ Dengue Duo trong bài viết sau đây.

1 Tổng quan về sốt xuất huyết Dengue

Vi rút sốt xuất huyết Dengue lây truyền qua muỗi Ae. aegypti và Ae. albopictus, phân bố rộng rãi ở các vùng nhiệt đới và cận nhiệt đới trên thế giới. Sốt xuất huyết Dengue là một bệnh do vi rút truyền qua động vật chân khớp quan trọng vì những thương tật và tử vong ở người do chúng gây ra. 

Có bốn kiểu huyết thanh khác biệt đã được biết: vi rút sốt xuất huyết dengue 1, 2, 3 và 4. Ở trẻ em, nhiễm vi rút thường là cận lâm sàng hoặc gây ra bệnh sốt hạn chế do bản thân. Tuy nhiên, nếu bệnh nhân bị tái nhiễm với một kiểu huyết thanh khác, nguy cơ mắc các bệnh nặng hơn sẽ tăng lên, chẳng hạn như sốt xuất huyết dengue hoặc hội chứng sốc dengue. 

Kháng nguyên NS1 là một glycoprotein đặc thù thường xuất hiện với nồng độ cao trong huyết thanh của bệnh nhân nhiễm vi rút sốt xuất huyết dengue, trong giai đoạn lâm sàng sớm của bệnh.

Kháng nguyên NS1 được tìm thấy trong các mẫu bệnh phẩm của bệnh nhân bị nhiễm dengue nguyên phát hoặc thứ phát từ 1 đến 9 ngày sau khi bắt đầu sốt. 

IgM thường có thể phát hiện được 5 đến 10 ngày sau khi phát bệnh trong các trường hợp nhiễm dengue nguyên phát và 4 đến 5 ngày sau khi phát bệnh trong các trường hợp nhiễm dengue thứ phát. Trong trường hợp nhiễm dengue nguyên phát, IgG xuất hiện vào ngày thứ 14 và tồn tại suốt đời. Trong trường hợp nhiễm dengue thứ phát, nồng độ IgG tăng trong 1 – 2 ngày sau khi khởi phát triệu chứng và dẫn đến phản ứng IgM 20 ngày sau khi nhiễm vi-rút. ^[1]

2 Thành phần

2.1 Các vật liệu

Kit thử Bioline™ Dengue Duo có các thành phần sau để thực hiện xét nghiệm:

Cách thành phần	Số catalog 11FK45	Số catalog 11FK46
Test thử kết hợp Dengue NS1 Ag và Dengue IgG/IgM, được đóng gói riêng đi kèm gói hút ẩm	10	25
Dung dịch pha loãng dành cho xét nghiệm Dengue IgG/IgM	1 x 3ml	1 x 5ml
Pipet mao quản dành cho xét nghiệm dengue IgG/IgM (10 μl)	10	25
Ống nhỏ giọt dùng một lần dành cho xét nghiệm dengue NS1 Ag	10	25
Hướng dẫn sử dụng	1	1

2.2 Hoạt chất của các thành phần chính

2.2.1 [Dengue NS1 Ag]

1 test thử bao gồm: Phức hợp vàng: Hỗn hợp kháng thể chuột đơn dòng kháng dengue NS1 Ab (0,0623 ± 0,0200 μg), chất keo vàng IgY từ gà (0,050 ± 0,015 μg), vạch thử: Hỗn hợp kháng thể chuột đơn dòng kháng dengue NS1 Ab (0,64 ± 0,20 μg), vạch chứng: Kháng thể đơn dòng chuột kháng gà IgY (0,64 ± 0,20 μg)

2.2.2 [Dengue IgG/IgM]

1 test thử bao gồm: Phức hợp vàng: Kháng thể chuột đơn dòng kháng dengue Ab – chất keo vàng (0,467 ± 0,014 μg), Kháng thể chuột kháng Ab – chất keo vàng (0,002 ± 0,001 μg), vạch thử G: Kháng thể chuột đơn dòng kháng người IgG (0,512 ± 0,154 μg), vạch thử M: Kháng thể chuột đơn dòng kháng người IgM (0,32 ± 0,10 μg), vạch chứng: IgG dê kháng chuột (0,576 ± 0,173 μg)

2.2.3 Dung dịch pha loãng

Bao gồm: 100mM dung dịch đệm phosphate (q.s.), natri azua(0,01 w/v%)

3 Nguyên lý hoạt động của Kit test Bioline™ Dengue Duo

Test thử Bioline™ Dengue Duo bao gồm hai xét nghiệm sắc ký miễn dịch in vitro (trong ống nghiệm) để phân tích tình trạng nhiễm dengue trong huyết thanh, huyết tương hoặc máu toàn phần của người (phía bên trái; xét nghiệm Dengue NS1 Ag, phía bên phải; xét nghiệm Dengue IgG/IgM). Xét nghiệm kháng nguyên Dengue NS1 là xét nghiệm một bước có độ nhạy và độ đặc hiệu cao để phát hiện định tính kháng nguyên NS1 của virus sốt xuất huyết dengue.

Khi được thêm vào mẫu bệnh phẩm đúng cách, kháng nguyên NS1 có trong mẫu bệnh phẩm sẽ phản ứng với phức hợp keo vàng kháng thể chuột đơn dòng kháng dengue Ab, tạo thành một phức hợp kháng thể và kháng nguyên. Khi phức hợp này di chuyển dọc test thử theo phương pháp sắc ký, thì phức hợp này sẽ được thu thập bởi các kháng thể cố định tạo ra vạch thử có màu gần với “T” (vạch thử kháng nguyên NS1). 

Vạch thứ hai được sử dụng cho quy trình kiểm chuẩn và sẽ luôn xuất hiện gần với “C” (vạch chứng) nếu quy trình xét nghiệm được thực hiện đúng cách và các hoạt chất của thành phần chính trên test thử hoạt động. Khi kháng nguyên NS1 của virus sốt xuất huyết dengue xuất hiện trong mẫu bệnh phẩm, cả vạch chứng (“C”) và vạch thử (“T”) đều xuất hiện trong ô cửa sổ đọc kết quả, cho biết kết quả dương tính. Kết quả là âm tính khi chỉ có vạch chứng (“C”) xuất hiện đối với các mẫu bệnh phẩm không chứa kháng nguyên NS1 hoặc chứa kháng nguyên NS1 dưới mức có thể phát hiện được. 

Xét nghiệm Dengue IgG/IgM là một xét nghiệm định tính để phát hiện khác biệt giữa kháng thể IgG và IgM kháng vi rút sốt xuất huyết dengue. Xét nghiệm này phát hiện các kháng thể cho cả bốn kiểu huyết thanh sốt xuất huyết dengue bằng cách sử dụng hỗn hợp các protein vỏ của dengue tái tổ hợp. Khi được thêm vào mẫu bệnh phẩm đúng cách, IgG và IgM kháng dengue trong mẫu bệnh phẩm sẽ phản ứng với các protein vỏ của vi rút sốt xuất huyết dengue tái tổ hợp-phức hợp keo vàng, tạo thành một phức hợp kháng thể và kháng nguyên. Khi phức hợp này di chuyển dọc test thử theo phương pháp sắc ký, thì phức hợp này được thu thập bởi IgG kháng người cố định và/hoặc IgM kháng người, tạo ra hai vạch thử có màu gần với “G” (vạch thử dengue IgG) và/hoặc “M” (vạch thử dengue IgM). Vạch thứ ba được sử dụng cho quy trình kiểm chuẩn và sẽ luôn xuất hiện gần với “C” (vạch chứng) nếu quy trình xét nghiệm được thực hiện đúng cách và các hoạt chất của thành phần chính trên test thử hoạt động. Khi có kháng thể dengue trong mẫu bệnh phẩm, cả vạch chứng (“C”) và vạch thử (“G” và/hoặc “M”) đều xuất hiện trong ô cửa sổ đọc kết quả, cho biết kết quả dương tính. Kết quả là âm tính khi chỉ có vạch chứng (“C”) xuất hiện đối với các mẫu bệnh phẩm không chứa dengue IgG/IgM (“G”/”M”) hoặc chứa các kháng thể này dưới mức có thể phát hiện được

4 Mục đích của xét nghiệm Bioline™ Dengue Duo

Test thử Bioline™ Dengue Duo Abbott là một xét nghiệm sắc ký miễn dịch in vitro (trong ống nghiệm), xét nghiệm một bước được thiết kế để phát hiện kháng nguyên NS1, kháng thể IgG và IgM kháng vi rút sốt xuất huyết dengue trong huyết thanh, huyết tương hoặc máu toàn phần của người. Xét nghiệm này nhằm mục đích sử dụng trong chuyên môn, để hỗ trợ chẩn đoán giả định các trường hợp nhiễm dengue nguyên phát và thứ phát. Bioline™ Dengue Duo chỉ cung cấp kết quả xét nghiệm sơ bộ. Các phương pháp chẩn đoán thay thế cụ thể phải được sử dụng để có được xác nhận nhiễm vi rút sốt xuất huyết dengue. Điều này có thể bao gồm việc phân lập vi rút, phát hiện kháng nguyên trong các mô cố định, RT-PCR và xét nghiệm huyết thanh học như ức chế đông máu.

5 Các bước chuẩn bị

Bước 1: Trước tiên, mở hộp và kiểm tra các thành phần sau:

1. Test thử kèm gói hút ẩm đựng trong từng túi giấy bạc riêng biệt

2. Dung dịch pha loãng

3. Ống nhỏ giọt dùng một lần

4. Pipet mao quản

5. Hướng dẫn sử dụng

Bước 2

Đọc kĩ hướng dẫn sử dụng test thử Bioline™ Dengue Duo

Bước 3

Sau đó kiểm tra hạn dùng ở mặt sau của túi giấy bạc. Nếu đã quá hạn dùng, hãy sử dụng một lô khác

Bước 4 

Mở túi giấy bạc và kiểm tra các thành phần sau.

1. Vùng nhỏ mẫu cho Dengue IgG/IgM

2. Giếng chứa dung dịch pha loãng

3. Vùng nhỏ mẫu cho Dengue NS1

4. Túi hút ẩm

6 Hướng dẫn sử dụng

6.1 Đối với Kit test Dengue NS1 Ag

Bước 1: Thu thập mẫu bệnh phẩm

Máu (bằng cách chích đầu ngón tay, không sử dụng máu mao mạch), mẫu huyết tương hoặc huyết thanh

Bóp nhẹ một ống nhỏ giọt dùng một lần mới và hút mẫu.

Bước 2 

Cho 3 giọt (khoảng 100 μl) mẫu bệnh phẩm vào vùng nhỏ mẫu “S”

6.2 Đối với Kit test Dengue IgG/IgM

Bước 1: Thu thập mẫu bệnh phẩm

Máu (bằng cách chích đầu ngón tay, không sử dụng máu mao mạch), mẫu huyết tương hoặc huyết thanh

Sử dụng pipet mao quản dùng một lần mới, hút mẫu lên đến vạch đầy (10 μl).

Chú ý: Không nên sử dụng mẫu đã tan huyết hoặc được lưu trữ trong thời gian dài (hơn 24 giờ).

Bước 2: Cho 10 μl mẫu bệnh phẩm vào vùng nhỏ mẫu hình vuông

Bước 3 : Cho 4 giọt (khoảng 90-120 μl) dung dịch pha loãng vào vùng chứa chất pha loãng hình tròn. Cần nhỏ chính xác 4 giọt khi giữ chai thẳng đứng.

Bước 4: Đọc kết quả xét nghiệm vào 15~20 phút sau.

Kết quả có thể không chính xác khi đọc sau 20 phút .

7 Cách đọc kết quả

7.1 Đối với Kit test Dengue NS1 Ag

Âm tính 

Sự xuất hiện của vạch chứng (“C”) trong ô cửa sổ đọc kết quả chỉ ra rằng kháng nguyên NS1 không có trong mẫu bệnh phẩm hoặc xuất hiện dưới mức có thể phát hiện được

Dương tính

Sự xuất hiện của hai vạch màu (“C” và “T”) trong ô cửa sổ đọc kết quả cho thấy mẫu bệnh phẩm dương tính với kháng nguyên NS1. Thậm chí nếu vạch “T” mờ, xét nghiệm vẫn là dương tính. Điều này cho biết nhiễm dengue giai đoạn đầu.

Không hợp lệ

Không có vạch chứng (“C”) nào trong ô cửa sổ đọc kết quả có nghĩa là xét nghiệm không hợp lệ, cho dù vạch thử (“T”) có xuất hiện hay không. Người dùng có thể đã không thực hiện đúng hướng dẫn hoặc test thử đã bị hỏng. Khi nhận được kết quả không hợp lệ, cần xét nghiệm lại mẫu bệnh phẩm bằng một test thử mới. ^[2]

7.2 Đối với Kit test Dengue IgG/IgM

Âm tính

Chỉ xuất hiện vạch chứng (“C”) trong ô cửa sổ đọc kết quả cho biết rằng kháng thể IgG và IgM kháng dengue không có trong mẫu bệnh phẩm hoặc xuất hiện dưới mức có thể phát hiện được. Xét nghiệm lại sau 3 – 5 ngày nếu nghi ngờ nhiễm dengue.

Dương tính

Sự xuất hiện của hai vạch màu (“C” và “M”) trong ô cửa sổ đọc kết quả cho biết rằng mẫu bệnh phẩm dương tính với kháng thể IgM kháng dengue. Thậm chí nếu vạch “M” mờ, xét nghiệm vẫn là dương tính. Điều này cho biết nhiễm dengue nguyên phát.

Sự xuất hiện của hai vạch màu (“C” và “G”) trong ô cửa sổ đọc kết quả cho biết rằng mẫu xét nghiệm dương tính với kháng thể IgG kháng dengue. Thậm chí nếu vạch “G” mờ, xét nghiệm vẫn là dương tính. Điều này cho biết nhiễm dengue thứ phát hoặc đã nhiễm trước đây

• [ lgG và IgM dương tính ]

Sự xuất hiện của ba vạch màu (“C”, “M” và “G”) trong ô cửa sổ đọc kết quả cho biết rằng mẫu bệnh phẩm dương tính với cả kháng thể IgM và IgG kháng dengue. Thậm chí nếu vạch “M” và/hoặc “G” mờ, xét nghiệm vẫn được coi là dương tính. Điều này cho biết nhiễm dengue nguyên phát muộn hoặc thứ phát sớm.

Không hợp lệ 

Không xuất hiện vạch chứng (“C”) nào trong ô cửa sổ đọc kết quả có nghĩa là xét nghiệm không hợp lệ, cho dù có vạch thử (“M” và/hoặc “G”) hay không. Người dùng có thể đã không thực hiện đúng hướng dẫn hoặc test thử đã bị hỏng. Khi nhận được kết quả không hợp lệ, cần xét nghiệm lại mẫu bệnh phẩm bằng một test thử mới.

8 Lưu ý khi sử dụng và bảo quản

8.1 Thu thập và bảo quản mẫu bệnh phẩm

8.1.1 Máu toàn phần

Sử dụng kim chích tĩnh mạch, lấy máu toàn phần vào ống lấy máu (chứa chất chống đông bao gồm herapin, EDTA và natri citrat).

Chú ý: Không sử dụng máu mao mạch.

Nếu mẫu thử máu không được xét nghiệm ngay thì phải cho mẫu thử vào tủ lạnh từ 2 đến 8°C.

Nếu bảo quản ở nhiệt độ từ 2 đến 8°C, cần xét nghiệm mẫu máu trong vòng 3 ngày.

Không sử dụng mẫu máu được bảo quản quá 3 ngày vì điều đó có thể gây ra phản ứng không đặc hiệu.

Để mẫu máu đạt nhiệt độ phòng (15 – 30°C) trước khi sử dụng.

8.1.2 Huyết tương hoặc Huyết thanh

[Huyết tương] Sử dụng kim chích tĩnh mạch, lấy máu toàn phần vào ống lấy máu (chứa chất chống đông bao gồm herapin, EDTA và natri citrat), sau đó ly tâm ống để lấy mẫu huyết tương.
[Huyết thanh] Sử dụng kim chích tĩnh mạch, lấy máu toàn phần vào ống lấy máu (KHÔNG chứa chất chống đông). Để máu đông trong 30 phút, sau đó ly tâm ống để lấy huyết thanh nổi bên trên.

8.2 Cảnh báo

1. Chỉ dùng cho chẩn đoán in vitro (trong ống nghiệm). Không tái sử dụng test thử và các thành phần trong kit thử.

2. Cần thực hiện chính xác theo hướng dẫn để có kết quả chính xác. Bất cứ ai thực hiện xét nghiệm với sản phẩm này phải được tập huấn cách sử dụng và có kinh nghiệm trong các quy trình xét nghiệm.

3. Không ăn uống hoặc hút thuốc trong khi xử lý mẫu bệnh phẩm.

4. Đeo găng tay trong khi xử lý mẫu bệnh phẩm và rửa tay kỹ sau đó.

5. Tránh làm văng hay tạo khí dung từ mẫu bệnh phẩm hay dung dịch pha loãng.

6. Lau sạch dung dịch bị đổ bằng chất tiệt trùng thích hợp.

7. Khử nhiễm và thải bỏ tất cả mẫu thử, kit phản ứng và các vật liệu có nguy cơ lây nhiễm (ví dụ như dụng cụ lấy mẫu, test thử) trong thùng chứa chất thải nguy hiểm sinh học theo quy trình dành cho rác thải lây nhiễm.

8. Không được uống dung dịch pha loãng.

9. Dung dịch pha loãng chứa tác nhân kháng vi khuẩn độc quyền, natri azua, không gây nguy hiểm cho người dùng nếu tuân theo các biện pháp phòng ngừa an toàn thông thường trong phòng xét nghiệm.

Nếu dung dịch pha loãng tiếp xúc với mắt và/hoặc da, hãy rửa sạch vùng cơ thể bị ảnh hưởng bằng nước và xà phòng ngay lập tức. Nếu bị kích ứng hoặc có dấu hiệu nhiễm độc, hãy liên hệ dịch vụ y tế ngay lập tức.

8.3 Bảo quản và độ ổn định của kit thử

1. Test thử nhạy với cả nhiệt độ và độ ẩm và phải được sử dụng và bảo quản đúng cách.

• Bảo quản kit thử ở nhiệt độ từ 1°C đến 30°C. Không đóng băng kit thử hoặc các thành phần của bộ kit hoặc để chúng tiếp xúc với nhiệt độ cao.

• Thực hiện xét nghiệm ngay sau khi lấy test thử ra khỏi túi giấy bạc và để tránh tiếp xúc với độ ẩm.

2. Không sử dụng bộ kit hoặc các thành phần bên trong quá hạn.

3. Không dùng test thử nếu túi đựng bị rách hoặc mép dán bị hở.

9 Thông tin chung

Nhà sản xuất: Abbott Diagnostics Korea Inc.

Quy cách đóng gói: 10 test/hộp

10 Bioline™ Dengue Duo giá bao nhiêu?

Bioline™ Dengue Duo hiện nay đang được bán ở nhà thuốc online Trung Tâm Thuốc Central Pharmacy, giá sản phẩm có thể đã được cập nhật ở đầu trang. Hoặc để biết chi tiết về giá sản phẩm cùng các chương trình ưu đãi, bạn có thể liên hệ với nhân viên nhà thuốc qua số hotline 1900 888 633 để được tư vấn thêm.

11 Bioline™ Dengue Duo mua ở đâu?

Bioline™ Dengue Duo mua ở đâu chính hãng, uy tín nhất? Bạn có thể mua thuốc trực tiếp tại Nhà thuốc Trung Tâm Thuốc Central Pharmacy tại địa chỉ: Ngõ 116, Nhân Hòa, Thanh Xuân, Hà Nội. Hoặc liên hệ qua số hotline/ nhắn tin trên website để đặt thuốc cũng như được tư vấn sử dụng thuốc đúng cách. 

12 Ưu điểm

• Test thử Bioline™ Dengue Duo là một xét nghiệm sắc ký miễn dịch in vitro (trong ống nghiệm), xét nghiệm một bước được thiết kế để phát hiện kháng nguyên NS1, kháng thể IgG và IgM kháng vi rút sốt xuất huyết dengue trong huyết thanh, huyết tương hoặc máu toàn phần của người
• Phát hiện đồng thời sốt xuất huyết Dengue Ag & Ab, Bao gồm tất cả các giai đoạn lâm sàng từ giai đoạn cấp tính đến giai đoạn hồi phục của nhiễm trùng
• Kết quả kiểm tra nhanh: 15~20 phút
• Điều kiện bảo quản thuận tiện: 1~30°C

13 Nhược điểm

• Giá thành khá cao 
• Bất cứ ai thực hiện xét nghiệm với sản phẩm này phải được tập huấn cách sử dụng và có kinh nghiệm trong các quy trình xét nghiệm.

---

Tổng 9 hình ảnh

Tài liệu tham khảo

1. ^ Tác giả Timothy J. Schaefer (đăng ngày 14 tháng 11 năm 2023). Dengue Fever, Pubmed. Truy cập ngày 29 tháng 11 năm 2023
2. ^ Tờ hướng dẫn sử dụng Bioline™ Dengue Duo do nhà sản xuất công bố, xem và tải bản PDF tại đây